兽医向我咨询的最频繁的话题之一就是如何解释真菌在皮肤真菌试验培养基(DTM)上的生长结果。真菌培养是针对很多症状的重要早期诊断步骤,包括毛囊炎、斑块状脱毛、甚至类似落叶型天疱疮的面部结痂。作为一种人畜共患疾病,皮肤癣菌病是鉴别诊断列表中不容忽略的一个。
了解什么能让DTM发生变化会有助于解读培养结果。DTM能增强抗生素(庆大霉素、金霉素)对细菌的抑制效果,放线菌酮可抑制腐生真菌的生长,同时酚红作为指示剂。它含有碳水化合物和蛋白质等营养成分。皮肤真菌(属于小孢子菌属、表皮癣菌属、毛癣菌属等三个属的真菌,)优先利用蛋白质作为能量来源,而大多数腐生真菌优先利用碳水化合物。这一特点是解释DTM颜色变化的关键。皮肤癣菌生长初期,通常(但并不总是)蛋白质的碱性代谢产物导致DTM由黄色变为红色。腐生菌的菌落很多时候也可能有这样的结果,但一般是在菌落更大的时候。所以需要每天观察培养基,以确保红色出现之前有较大菌落存在。除了观察培养基颜色变化,DTM菌落的解读还应该包括对菌落形态的肉眼和显微镜观察。皮肤癣菌在DTM上通常着色较浅(白色,米色,黄褐色或肉桂色),而常见的腐生菌通常着色很深。菌落表面性状对兽医学判断也很重要,皮肤癣菌常被描述为粉状、颗粒状或絮状。
图1DTM/沙氏琼脂培养基SabouraudAgar上的犬小孢子菌
在对疑似菌落进行镜检时,先准备了一块玻片,用洁净的透明胶带轻触菌落的表面,与玻片粘贴,滴有一滴改良瑞氏染液。犬小孢子菌和石膏样小孢子菌的大分生孢子很容易找到,但石膏样毛癣菌在DTM上不产生大分生孢子。犬小孢子菌的大分生孢子一般有六个或更多细胞,细胞壁厚,末端有多个疙瘩。石膏样小孢子菌分生孢子数量多、椭圆形、有较薄的细胞壁、四到六个细胞。石膏样毛癣菌在显微镜下的某些可见特征是螺旋状菌丝和呈葡萄状簇集的单细胞小分生孢子。
图2玻片准备
图3犬小孢子菌
图4石膏样小孢子菌
颜色变化的时间、菌落的大体外观、以及镜检检查结果综合起来可以得出确诊。真菌培养是兽医皮肤科最重要的实验室检测程序之一,它可以用来排除或确认癣菌病。如果结果大多数为阳性,那么之后可能会较少推荐使用。
JonPlant,DVM,DACVD
线下培训,购买即送积分,快来!
北京中科白殿疯怎么走北京治疗白癜风的中医院